Большой справочник анализов

Исследование системы гемостаза

Биологическая система, обеспечивающая, с одной стороны, предупреждение и купирование кровотечений, а с другой – сохранение жидкого состояния циркулирующей крови, обозначается как система поддержания гемостатического потенциала крови (гемостаза). Эта система является частью более сложной многокомпонентной системы регуляции агрегатного состояния крови, в которую включаются все органы и ткани, участвующие в продукции, метаболизме и нейрогуморальной регуляции компонентов системы гемостаза.

В осуществлении гемостаза принимают участие три взаимодействующих между собой функционально‑структурных компонента: стенки кровеносных сосудов, клетки крови (в первую очередь тромбоциты) и плазменные ферментные системы – свертывающая, фибринолитическая, или плазминовая, калликреин‑кининовая и система комплемента. Сосудисто‑тромбоцитарный гемостаз

Внутренняя поверхность кровеносных сосудов (эндотелий) обладает высокой способностью препятствовать образованию тромбов и играет важную роль в сохранении жидкого состояния циркулирующей крови. Это свойство эндотелия связано со следующими его особенностями:

1) способностью образовывать и выделять в кровь мощный ингибитор агрегации тромбоцитов – простациклин, который препятствует склеиванию тромбоцитов;

2) продукцией тканевого активатора, расщепляющего тромбы (фибринолиза);

3) неспособностью к контактной активации системы свертывания крови;

4) созданием антикоагулянтного потенциала на границе кровь/ткань путем фиксации на эндотелии комплекса гепарин – антитромбин III;

5) способностью удалять из кровотока активированные факторы свертывания крови.

Вместе с тем стенка сосудов в силу своих анатомо‑физиологических особенностей – ригидности, эластичности, пластичности – способна противостоять не только давлению крови, но и умеренным внешним травмирующим воздействиям, в силу чего они препятствуют возникновению кровоизлияния (геморрагии). Это свойство, как и способность противостоять выходу эритроцитов из капилляров путем выпота, то есть через механически не поврежденную стенку сосудов, зависит от полноценности эндотелия и от особенностей строения субэндотелиального слоя – степени развития и качества коллагена и микрофибрилл, соотношения коллагеновых и эластических волокон, структуры базальной мембраны. Эти свойства в значительной степени зависят от количества и качественных особенностей тромбоцитов, в силу чего при недостаточном их содержании в крови и/или при тромбоцитопатиях усиливаются как кровоточивость, так и ломкость микрососудов (капилляров).

Капилляры отвечают на повреждение выраженным локальным спазмом – рефлекторным и связанным с высвобождением из стенок сосудов и тромбоцитов адреналина, норадреналина, серотонина и других биологически активных веществ.

Повреждение стенки сосудов способствует активации свертывания крови и тромбоцитарного гемостаза несколькими путями:

1) выделением в кровь тканевого тромбопластина (фактора III, апопротеина С) и других активаторов свертывания и агрегации тромбоцитов – адреналина, норадреналина;

2) контактной активацией коллагеном и другими компонентами субэндотелия как тромбоцитов (склеивания), так и свертывания крови (активация фактора XII);

3) продукцией плазменных кофакторов адгезии и агрегации тромбоцитов – фактора Виллебранда.

Таким образом, стенка сосудов тесно связана и взаимодействует со всеми другими звеньями системы гемостаза, особенно с тромбоцитами.

Участие тромбоцитов в гемостазе определяется в основном следующими их функциями:

1) ангиотрофической – способностью поддерживать нормальную структуру и функцию микрососудов, их устойчивость к повреждающим воздействиям, непроницаемость по отношению к эритроцитам;

2) способностью поддерживать спазм поврежденных сосудов путем высвобождения вазоактивных веществ – адреналина, норадреналина, серотонина;

3) способностью закупоривать поврежденные сосуды путем образования первичной тромбоцитарной пробки (тромба), включающей приклеивание тромбоцитов к стенке сосуда, склеивание их друг с другом, а также синтез, накопление и секрецию активных веществ, стимулирующих адгезию и агрегацию;

4) тромбопластической – способностью тромбоцитов выделять кровеостанавливающие факторы.

Первичная остановка кровотечения в капиллярах осуществляется в основном за счет тромбоцитов. При этом выраженное увеличение времени кровотечения регистрируется не только при значительной тромбоцитопении (менее 30–50 × 109/л). Среди наследственных форм вторичной дисфункции тромбоцитов наиболее важной и распространенной в клинической практике является ангиогемофилия (болезнь Виллебранда), при которой время кровотечения увеличивается до 0,5–1 ч и более, а среди приобретенных форм – нарушения функции тромбоцитов при ДВС‑синдроме (тромбоцитопатия потребления, повреждающее действие продуктов протеолиза), уремии, приеме лекарственных средств (аспирин, антикоагулянты, фибринолитики).

Ведущая роль в реализации первичного гемостаза принадлежит адгезивно‑агрегационной функции тромбоцитов. Чаще всего пусковую роль в этом процессе играет повреждение стенки кровеносных сосудов, вследствие чего тромбоциты вступают в контакт с субэндотелием, в частности – с главным стимулятором адгезии коллагеном, набухают, образуют отростки и приклеиваются (адгезируют) на этих участках. Другими словами, тромбоциты находят место повреждения, приклеиваются к краю поврежденного сосуда, затем увеличиваются в размерах и закрывают отверстие своим «телом». Важнейшими плазменными кофакторами этого процесса являются ионы кальция и синтезируемый в эндотелии белок – фактор Виллебранда (фактор VIII), а в тромбоцитах – взаимодействующий с фактором Виллебранда мембранный гликопротеин.

Из тромбоцитов, подвергающихся адгезии и агрегации, активно секретируются гранулы, которые содержат вещества, усиливающие процесс агрегации и формирующие вторую волну гемостаза.

В результате взаимодействия тромбоцитарных и плазменных факторов в зоне гемостаза образуется тромбин, малые дозы которого резко усиливают и завершают процесс агрегации и одновременно вызывают свертывание крови, в силу чего тромбоцитарный сгусток покрывается фибрином и уплотняется.

Чрезвычайно важную роль в регуляции тромбоцитарного гемостаза играют производные арахидоновой кислоты, высвобождаемой из мембранных фосфолипидов тромбоцитов и стенки сосудов вследствие активации фосфолипаз. В дальнейшем под влиянием циклооксигеназы из арахидоновой кислоты образуются простагландины, а из них в тромбоцитах под влиянием тромбоксансинтетазы вырабатывается чрезвычайно мощный агрегирующий агент – тромбоксан А 2, а в стенке сосудов под влиянием простациклинсинтетазы образуется основной ингибитор агрегации – простациклин. Нарушение образования тромбоксана А 2 в результате снижения активности или блокады циклооксигеназы или тромбоксансинтетазы ведет к выраженному нарушению функции тромбоцитов, способствует развитию кровоточивости, что наблюдается при ряде наследственных и приобретенных тромбоцитопатий. Наоборот, нарушение синтеза в стенке сосудов простациклина или ослабление его поступления в кровь ведет к повышенной склонности тромбоцитов к агрегации и повышенному тромбообразованию.

Для осуществления адгезивно‑агрегационной функции тромбоцитов необходим ряд плазменных кофакторов агрегации – ионы кальция и магния, фибриноген, альбумин и два белковых кофактора, именуемые агрексонами А  и В , фосфолипидный кофактор.

Вместе с тем парапротеины, криоглобулины и продукты фибринолиза ингибируют агрегацию тромбоцитов. К белковым ингибиторам этого процесса относятся также простациклинзависимый макромолекулярный белок, фактор Барнес – Лиана. Коагуляционный гемостаз

Свертывание крови – сложный ферментный процесс, в котором участвует ряд протеолитических ферментов, а также неферментные белковые и фосфолипидные компоненты, резко ускоряющие и усиливающие активацию и действие ферментов (табл. 6).

Условно процесс свертывания крови может быть разделен на две основные фазы:

1) начальную многоступенчатую, приводящую к активации протромбина (фактора II) с превращением его в активный фермент – тромбин;

2) конечную, в которой фибриноген под влиянием тромбина превращается вначале в мономеры фибрина, а затем – в фибрин‑полимер, который стабилизируется активированным фактором XIII.

Свертыванию крови противодействуют первичные (самостоятельно синтезируемые) и вторичные (образующиеся в процессе свертывания и фибринолиза) физиологические антикоагулянты.

Фибриноген  – глобулярный гликопротеин, состоящий из двух одинаковых субъединиц. Каждая из субъединиц состоит из трех цепей. Вначале тромбин отщепляет от этой молекулы пептиды А. Появление свободных пептидов А в циркулирующей крови (определяются иммунологически с помощью анти‑А‑сыворотки) служит признаком тромбинемии и используется в качестве «свидетеля» внутрисосудистого свертывания крови (при ДВС‑синдроме, массивных тромбозах).

Общая оценка конечного этапа процесса свертывания проводится с помощью тромбинового теста. Тест имеет большое значение для диагностики многих нарушений свертываемости крови, его результаты важны для правильного толкования показаний всех других коагуляционных проб, поскольку торможение конечного этапа процесса удлиняет время свертывания во всех остальных исследованиях.

Механизмы трансформации протромбина в тромбин.

Согласно современной каскадно‑комплексной теории свертывания крови, активация протромбина (фактора II) является результатом многоступенчатого ферментного процесса, в котором последовательно активируются и взаимодействуют между собой различные факторы свертывания.

Различают два основных механизма запуска процесса свертывания – внешний и внутренний.

Таблица 6. Характеристика факторов свертывания крови

Внешний механизм запускается тканевым тромбопластином, который может попадать в плазму крови из поврежденных (травмы, операции) тканей, стенок сосудов (вырабатывается поврежденным эндотелием при участии активированных тромбоцитов), а также поступать в кровоток с тканевой жидкостью (эмболия околоплодными водами, перитонеально‑венозное шунтирование, различные виды шока). Непосредственно в крови тканевый тромбопластин может продуцироваться активированными моноцитами. В большом количестве тканевый тромбопластин вырабатывается и клетками некоторых злокачественных опухолей (в том числе лейкозными).

Тканевый тромбопластин образует комплекс с ионами кальция и фактором VII, активируя последний, в результате образуется мощный ферментный активатор фактора X.